Artículo Original. Revista OACTIVA UC Cuenca . Vol. 3, No. 3, pp. 17-22, Septiembre-Diciembre, 2018. ISSN 24778915. ISSN Elect. 2588-0624. Universidad Católica de Cuenca

EFECTO ANTIMICROBIANO DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE CAESALPINIA ESPINOSA (TARA) AL 60 %, SOBRE EL ENTEROCOCCUS FAECALIS.

ANTIMICROBIAL EFFECT OF A 60% ETHANOLIC EXTRACT OF CAESALPINIA ESPINOSA(TARA) ON ENTEROCOCCUS FAECALIS

Bornaz-Arenas Vanessa L .1* Bornaz-Acosta Juan G.2

1Docente de la Univ. Andina Néstor Cáceres Velasquez. 2Docente Univ. Nacional Jorge Basadre Ghroman.

* bornazzz@hotmail.com

Resumen

El Enterococcus Faecalis se considera una de las cepas más resistente al grupo de soluciones Desinfectantes habitualmente manipuladas en los tratamientos de ConductosOBJETIVO: Establecer la producción de efecto inhibitorio de la Caesalpinia espinosa (Tara) sobre la cepa Enterococcus Faecalis MATERIALES Y MÉTODOS: Se realizó una siembra de la cepa ATCC 29212 (Enterococcus Faecalis) en placas con Agar Cerebro Corazón, luego se colocó en la superficie sensidiscos de 5 mm de diámetro con NaClO al 5,25 % como control y Caesalpinia espinosa (Tara) al 60 % como grupo experimental, para cada sustancia se utilizó 24 muestras; luego se incubó las placas en cámara de anaerobiosis a 37C, posteriormente se tomó medidas a las 24; 48 y 72 horas del halo inhibitorio resultante.RESULTADOS: Los datos obtenidos fueron ordenados y procesados, indicando el promedio de la medida del halo inhibitorio tanto de la Caesalpinia espinosa resultando este mayor que el formado por el Hipoclorito de Sodio, se aplicó un Test de Normalidad para los datos obtenidos con ambas sustancias, determinando que dichos datos tenían una distribución normal. Aplicando posteriormente T de Student (p<0,05), dando como resultado diferencia estadísticamente significativa entre los datos obtenidos para ambas sustancias.CONCLUSIÓN: La Caesalpinia espinosa, demostró tener efecto antibacteriano frente al Enterococcus Faecalis, sus medidas fueron variadas y en la mayoría superiores a Hipoclorito de Sodio.

Palabras clave: enterococcus faecalis, caesalpinia, hipoclorito de sodio.

Abstract

AMI:Enterococcus Faecalis is considered one of the strains more resistant to the solutions group disinfectants commonly manipulated in the treatments of ducts The objective of this research was to establish the production of inhibitory effect of Caesalpinia spinosa (tare) on the Enterococcus Faecalis strain MATERIALS AND METHODS: Was a seeding of the strain ATCC 29212 (Enterococcus Faecalis) plates with Agar brain heart, then it is placed on the surface of 5 mm diameter discs with NaClO to the 5,25% as control and Caesalpinia spinosa (tare) to 60% as a group experimental, for each substance was used 24 samples; then incubated in anaerobic Chamber plates at 37C, was subsequently taken measures 24; 48 and 72 hours after the resulting inhibitory halo RESULTS: Data were sorted and processed, indicating the average of the measurement of both the Caesalpinia spinosa inhibitory halo resulting this greater than that formed by sodium hypochlorite, applied a Test of normality for data obtained with both substances, determining that such data had a normal distribution. Then applying Student‘s T (p<0,05), giving as result statistically significant difference between the data obtained for both substances CONCLUSION:The Caesalpinia spinosa, proved to have antibacterial effect against Enterococcus Faecalis, its measures were varied and mostly higher than sodium hypochlorite.

Key words: enterococcus faecalis, caesalpinia, sodium hypochlorite.

1 INTRODUCCIÓN

En el mundo más del 90 % de la población sufre de caries sin embargo el paciente no le presta la atención debida

Revista OACTIVA UC Cuenca . Vol. 3, No. 3, Septiembre-Diciembre, 2018

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Bornaz-Arenas V, Bornaz-Acosta J.

en sus estadios incipientes por lo que sigue progresando hasta la afectación de los tejidos pulpares, siendo el posible tratamiento para poder conservar la pieza en boca realizar un tratamiento de conducto, cuyo procedimiento es para la remoción del tejido pulpar y así eliminar el daño.2, 8 Actual- mente existen sustancias medicamentosas utilizados en esta terapia, con el fin de disminuir o eliminar infecciones bacte- rianas y algunos de ellos fracasan.3, 4 En la actualidad, según estudios preliminares, una de las bacterias más tenaces al uso de sustancias antimicrobianas utilizadas en endodoncia es por ello que es responsable de la mayoría fracasos endodónticos es el Enterococcus faecalis.57

Actualmente los tratamientos odontológicos buscan re- ducir los índices de caries, índices de inadecuada higiene oral aplicando métodos, estrategias y programas preventivos de caries. Sin embargo estos aplicativos darán resultados en el futuro mientras que los procedimientos clínicos resuelven el daño que ya está presente: por lo tanto es importante con- siderar aplicar tratamientos conservadores, eliminando los microorganismos más agresivos presentes como en el caso del tratamiento Endodóntico y lograr así un éxito cercano al 100 %.8, 9 Actualmente, la medicina natural está en apogeo por los múltiples beneficios que nos dan las plantas en es especial de nuestro país, además de tener menos efectos secundarios que las sustancias sintéticas producidas en labo- ratorio. La Caesalpina espinosa, más conocida como tara, es una planta de la cual se obtiene una sustancia, que no solo será capaz de disminuir o eliminar microorganismos,1012 sino que también es un poderoso cicatrizante según estudios preliminares, siendo un producto natural tiene menor canti- dad de efectos adversos.13 Es significativo, que se realicen investigaciones para determinar el efecto antimicrobiano de sustancias de origen natural tomándolas como alternativa a las que ya existen en el mercado, siendo las sustancias natu- rales las más indicadas, debido que presentan menor cantidad de efectos adversos. Estos antecedentes nos ha motivado a estudiar el efecto antimicrobiano de Caesalpina espinosa.

2 MATERIALES Y MÉTODOS

Tipo de Investigación: De laboratorio, longitudinal Ni- vel de Investigación: Comparativo Experimental Diseño: Factorial de Grupos

Identificación de los grupos Los Grupos serán distri- buidos en las placa petri, 24 muestras para cada uno de los grupos; Grupo experimental: Caesalpinia Espinosa al 60 %, grupo control: Hipoclorito de Sodio al 5,25 % Criterios In- cluyentes Cepa Enterococcus Faecalis Criterios Excluyentes Cepa contaminada de Enterococcus Faecalis Descripción de la Técnica Se utilizó como materiales: un extracto de Cae- salpina espinosa (Tara) al 60 % para el desarrollo del grupo experimental; la cepa ATCC 29212 (Enterococcus faecalis) y una solución de HClO al 5,25 % para el grupo control. Se sembró la cepa en placas con Agar Cerebro Corazón, luego se colocó sensidiscos de 5 mm de diámetro con Hipoclorito de

Sodio al 5,25 % como control y Caesalpinia espinosa (Tara) al 60 % como grupo experimental; se utilizó 24 muestras por cada una de las sustancias a investigar; se colocó las placas en incubación en cámara de anaerobiosis a 37C, tomándose medidas de halo inhibitorio tomando medidas a las 24; 48 y 72 horas con una regla tipo vernier.

Para la sustancia HIPOCLORITO DE SODIO el pro- medio fue de 2,63896 en la primera medición; por lo tanto generó un halo inhibitorio de 2,64mm en la siembra micro- biológica. En la medición de 24 horas 2,73958 y en la tercera lectura 2,82625; lo que indica que el valor promedio va aumentando ligeramente de una medición a otra. Se concluye que el diámetro del día 1 posee una leve asimetría, luego el día 2 se va tornando menos asimétrico y el día 3 se va aproximando más a una distribución normal. La Desviación Estándar en la primera fue de 0,670042 en la segunda de 0,653748, y en la tercera de 0,703713, con respecto al míni- mo los datos se distribuyen en un rango de 1,250 a 1,500 para el primer día y el tercer día respectivamente, lo que índica que los valores mínimos del día 1 al día 3 fueron aumentando progresivamente, para el máximo los valores fueron de 3,750 para el día 1 para el día 2 la medida fue de 4,025 y 4,075 para el día 3 de lo cual se puede deducir que el valor máximo fue aumentando del día 1 al 3 lo que indica que fue una progresión constante. Los valores para la mediana fueron de 2,51500 para el día 1, 2,52500 para el día 2 y para el día 3 de 3,02500. En la asimetría se obtuvo para el día 1 un valor de 0,070 para el día 2 una valor de 0,401 y para el día 3 un valor de 0,301. Los valores en la curtosis para la primera medición fueron -0,649; para la segunda medición fueron -0,989 y para la tercera medición fue -0,890.

3RESULTADOS

Para la sustancia Caesalpinia espinosa nos da diámetros de la primera lectura de 6,01875; lo que interpreta que el halo inhibitorio fue 6. Posteriormente el halo fue de 6,18854; y finalmente en la tercera lectura fue de 6,33021; por lo que se determina que el halo va aumentando gradualmente.Se concluye que la medida del día 1 posee una leve asimetría, el día 2 se va volviendo menos asimétrico y el día 3 se va aproximando más a una distribución normal. La desviación Estándar en la primera medición fue de 0,720479; en la segunda de 0,674778; y en la tercera fue de 0,686238; con respecto al mínimo los datos se distribuyen en un rango de 4,500 a 5,025; para el primer día y el tercer día respecti- vamente, lo cual determina que los valores del día 1 al día 3 fueron aumentando progresivamente, para el máximo los valores fueron de 7,525 para el día 1; 7,575 para el día 2 y 7,525 para el día 3. De lo cual se deduce los valores aumentaron y luego se mantuvieron igual al día 1. Los valores para la mediana fueron de 6,05000 para el día 1; 6,25000 para el día 2 y para el día 3 de 6,35000. En la asimetría se obtuvo para el día 1 un valor de -0,021; para el día 2 un valor de -0,097 y para el día 3 un valor de -0,038. Los valores en

Revista OACTIVA UC Cuenca . Vol. 3, No. 3, Septiembre-Diciembre, 2018

Efecto antimicrobiano de Tara.

 

 

 

 

 

19

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

N

Promedio

Desviación

Mínimo

Máximo

Mediana

Asimetría

Curtosis

 

 

Estándar

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Día 1

24

6,01875

0,720479

4,500

7,525

6,0500

-0,021

0,150

 

 

Día 2

24

6,18854

0,74778

5,000

7,575

6,25000

-0,097

-0,180

 

 

Día 3

24

6,33021

0,686238

5,025

7,525

6,3500

-0,038

-0,705

 

 

Tabla 1: ESTADÍSTICOS DESCRIPTIVOS DEL GRUPO EXPERIMENTAL

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

N

Promedio

Desviación

Mínimo

Máximo

Mediana

Asimetría

Curtosis

 

 

Estándar

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Día 1

24

2,63896

0,670042

1,250

3,750

2,51500

0,070

-0,649

 

 

Día 2

24

2,73958

0,653748

1,750

4,025

2,52500

0,401

-0,989

 

 

Día 3

24

2,82625

0,703713

1,500

4,075

3,02500

0,031

-0,890

 

Tabla 2: ESTADÍSTICOS DESCRIPTIVOS DEL GRUPO CONTROL

la curtosis para la primera medición fueron 0,150; para la segunda medición fueron -0,180 y para la tercera medición fue -0,705.

Tabla 3.- Comparación primera lectura

Día 1

Grupo

 

 

Experimental

Control

Promedio

6,019

2,639

Mediana

6,050

2,515

Moda

6,250

2,000

Mínimo

4,500

1,250

Máximo

7,525

3,750

Desv, Est,

0,720

0,670

 

T de Student p<0,05

Tabla 4.- Comparación segunda lectura

Día 2

Grupo

 

 

Experimental

Control

Promedio

6,189

2,740

Mediana

6,250

2,525

Moda

6,250

2,525

Mínimo

5,000

1,750

Máximo

7,575

4,025

Desv, Est,

0,675

0,654

 

T de Student p<0,05

Los valores del promedio para el grupo Caesalpinia Espinosa es 6,019 y para el grupo Hipoclorito es de 2,639; determina que la discrepancia entre la media de ambos halos inhibitorios fue de por lo menos 3,38 mm, siendo el promedio de halos inhibitorios para la sustancia experimental mayor que la media de los halos inhibitorios de la sustancia control, la mediana para el control es 2,515 y para el experimental es 6,050; con respecto a la moda para el grupo del Hipoclorito es de 2,000 y para la Caesalpinia Espinosa es 6,250; el valor mínimo para el grupo control es de 1,250 y para el grupo experimental es de 4,500; el valor máximo para el grupo control es de 3,750 y para el grupo experimental es de 7,525;

tanto para los valores máximos y mínimos para el primer día de toma de datos, el grupo experimental Caesalpinia espinosa presentaba valores bastante altos a comparación del grupo control y con respecto a la desviación estándar los valores fueron de 0,670; para el hipoclorito y 0,720; para la Caesalpinia espinosa. Los promedios son muy disímiles y ambas distribuciones estadísticas tienen calores variados para los datos obtenidos a las 24 horas(Fig 1).

Tabla 5.- Comparación tercera lectura

Día 3

Grupo

 

 

Experimental

Control

Promedio

6,330

2,826

Mediana

6,350

3,025

Moda

6,000

2,075

Mínimo

5.025

1,500

Máximo

7,525

4,075

Desv, Est,

0,686

0,704

 

T de Student p<0,05

El Promedio para el grupo de Experimental es 6,189 y para el grupo Control es 2,740; lo cual determina que la diferencia entre las medias de los halos inhibitorios fue de 3.449 mm, el grupo experimental obtuvo un mayor promedio, la mediana para el Grupo control es 2,525 y para el grupo experimental es 6,250; con respecto a la moda para el grupo del Hipoclorito es de 2,525 y para la Caesalpinia espinosa es de 6,250; el valor mínimo para el grupo control es de 1,750 y para el grupo experimental es de 5,000; el valor máximo para el grupo control es de 4,025 y para el grupo experimental es de 7,575; tanto para los valores máximos y mínimos para el segundo día de toma de datos, el grupo experimen- tal Caesalpinia espinosa presentaba valores bastante altos a comparación del grupo control con respecto a la desviación estándar los valores fueron de 0,654; para el hipoclorito y 0,675; para la Caesalpinia espinosa.En la segunda lectura los promedios y rangos de datos, demuestran tener diferencia estadísticamente significativa, ambas distribuciones estadís- ticas tiene rangos muy variados(Fig 2).

Revista OACTIVA UC Cuenca . Vol. 3, No. 3, Septiembre-Diciembre, 2018

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Bornaz-Arenas V, Bornaz-Acosta J.

Fig. 1. COMPARACIÓN ENTRE EL GRUPO EXPERIMENTAL CAESALIPINIA ESPINOSA Y GRUPO CONTROL HIPOCLO- RITO DE SODIO EN LA PRIMERA LECTURA.

Fig. 3. COMPARACIÓN ENTRE EL GRUPO EXPERIMENTAL Y GRUPO EN LA TERCERA LECTURA.

Fig. 2. COMPARACIÓN ENTRE EL GRUPO CONTROL Y GRU-

PO EXPERIMENTAL EN LA SEGUNDA LECTURA.

Los valores del promedio para el grupo Caesalpinia espinosa es 6,330 y para el grupo Hipoclorito es 2,826; por lo que se con concluye que la discrepancia entre los promedios de ambos halos inhibitorios fue de 3,504 mm, los halos inhibitorios para grupo experimental resultaron ser mayores que el promedio de los halos inhibitorios del grupo control, la mediana para el Grupo control es 3,025 y para el grupo experimental es de 6,350; con respecto a la moda para el grupo del Hipoclorito es de 2,075 y para la Caesalpinia Espinosa es de 6,000; el valor mínimo para el grupo control es de 1,500 y para el grupo experimental es de 5,025; el valor máximo para el grupo control es de 4,075 y para el grupo experimental es de 7,525; tanto para los valores

máximos y mínimos para el primer día de toma de datos, el grupo experimental Caesalpinia espinosa presentaba valores bastante altos a comparación del grupo control y con respecto a la desviación estándar los valores fueron de 0,704; para el hipoclorito y 0,686; para la Caesalpinia espinosa.Se observa que los promedio son muy diferentes y ambas distribuciones estadísticas tienen rangos múltiples para los valores obteni- dos el día 3; demostrando tener diferencia estadísticamente significativa(Fig 3).

4DISCUSIÓN

Sánchez Ruiz y colaboradores.13 En su investigación sobre actividad microbiana de Hipoclorito de sodio al 5 % en la dilución 1:1 (2,5 %) dio como resultado que la actividad antimicrobiana no duró hasta las 72 horas. Podría deberse a que se trabajó con hipoclorito diluido, por lo tanto el alcance antimicrobiano se redujo, comparándolo con nuestro estudio el efecto antimicrobiano si duro 72 horas por que se trabajó con hipoclorito al 5 %. Espinel Pinzon Mercy.14 Su estudio fue realizado en 30 premolares que fueron infecta- dos con enterococcus Faecalis, a los cuales se les colocó 4 combinaciones de NaOCl y EDTA. Los resultados obtenidos fueron que ninguna de las sustancias utilizadas ya sea solas o mezcladas con el quelante lograron eliminar la cepa en cuestión. Uno de los factores que podría haber dado este resultado es que la investigación se realizó en diente natural ya sus compleja estructura anatómica pudo haber afectado el alcance del hipoclorito, a comparación de los resultados obtenidos en la presente investigación donde si se aprecia un efecto antimicrobiano en la cepa escogida. Kloucek, P y col.15 Su estudio fue realizado con extractos etanólicos al 80 % de nueve plantas obtenidos por maceración durante 5 días, una de ellas fue la Caesalpinia. spinosa utilizando

Revista OACTIVA UC Cuenca . Vol. 3, No. 3, Septiembre-Diciembre, 2018

Efecto antimicrobiano de Tara.

 

21

sus vainas; además se utilizó cinco cepas Gram positivas 11

Carson KR, Goodell GG, McClanahan SB. Comparison

y tres Gram negativas. Los resultados obtenidos fue que

 

of the Antimicrobial Activity of Six Irrigants on Primary

para el Enterococcus Faecalis se observó una CIM de 0,5

 

Endodontics Patogens. J Endodon 2005; 3: 471-473

mg/ml, para Bacillus cereus fue de 8 y de 16; para las demás 12

Barriga, C. Cultivo y Aprovechamiento de la Tara, Caesalpi-

bacterias, lo cual determina la especificidad y gran poder

 

nia espinosa, en la Región Andina. Informe Técnico. Lima

antimicrobiano de esta sustancia natural, lo fue corroborado

 

2008

por nuestro estudio.

13

Sánchez Ruiz J, Olivo, R y Garcia M. The effect of passive

5 CONCLUSIONES

 

ultrasonic activation of 2 % chlorhexidine or 5.25 % sodium

 

hypochlorite irrigant on residual antimicrobial activity in

 La Caesalpinia Espinosa al 60 % logró un halo inhi-

 

root canals. J of Endod Sept 2003; 29: 78-81.

bitorio de 6,33 mm; en promedio con una desviación típica 14

Espinel Pinzon M. Efecto antimicrobiano de hipoclorito de

de 0,68 frente al Enterococcus Faecalis  El HClO al 5,25 %

 

sodio y EDTA sobre Enterococcus Faecalis. Tesis para optar

 

el grado de magister en Salud Pública UNSA, 2011.

logró un halo inhibitorio de 2,82 mm en promedio con una

 

desviación típica de 0,7; frente al Enterococcus Faecalis  15

Kloucek P, Lima K y Fava L. Evaluation of the antibacterial

Se encontró diferencia estadísticamente significativa entre el

 

activities of calcium hydroxide, chlorhexidine, medicament.

efecto antimicrobiano de la Caesalpinia Espinosa (Tara) al

 

A Clinical and Laboratory Study. J Endodont, May, 2007.

60 % y el HClO al 5,25 % en el halo inhibitorio del Entero-

 

 

coccus Faecalis, esto con un margen de error del 5 %.  La

 

 

hipótesis nula fue rechazada, debido a que el Halo inhibitorio

 

Recibido: 13 de enero de 2018.

de la Tara al 60 % obtuvo mayores valores que el hipoclorito

 

de Sodio al 5,25 % por lo que su efecto antimicrobiano

 

Aceptado: 17 de marzo de 2018.

fue mayor para nuestra sustancia experimental en el halo

 

inhibitorio del Enterococcus Faecalis

 

 

Referencias

1Gonzalez MA, Gonzalez N. Infecciones bacterianas de ori- gen pulpar y periodontal. Oral Med Oral Pathol Oral Surg.

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2 Portenier I, Waltimo T. Haapasalo M. Enterococcus Fecalis and endash; the root canal survivor and “star” in post –treatment disease. Endod. Topics 2003;6 : 135-139

3 Stuart C. Schwartz S. Beeson T, Owatz C. Enterococcus Faecalis: Its role in root canal treatment failure and current concepts in retreatment. J Endod. 2006;32 : 93-98

4Attin et al, El hipoclorito de sodio disuelve tejido necrótico, no tejido vital. J International Endod. 2002

5 George S, Kishen A, Song K. The Role of Environmental Changes on Monospecies Biofilm Formation on Root Canal Wall by Enterococcus faecalis. J Endod. 2005; 31: 867-72.

6Lima K, Fava L, Siqueira J. Susceptibilities of Enterococ- cus faecalis biofilms to some antimicrobial medications. J

Endod. 2001; 27: 616-9.

7 Mc Hugh C, Zhang P, Michalek S, Eleazer P. Ph required to kill Enterococcus faecalis in vitro. J Endod. 2004;30 : 218- 219

8Frais, S. Gulabivala K. Some factors affecting the concen- tration of avaible chlorine in commercial sources of sodium hypochlorite. Int Endod J. 2001

9 García, G., Olivo, R, Ochoa, C. Complicaciones con el hipoclorito de sodio (NaOCL) al entrar en contacto con los tejidos periradiculares. Univers Odont. 2001. 21:26-29.

10Estrela C, Estrela CRA, Barbin EL, Spanó JL, Marchesan MA, Pécora JD. Mechanism of action of Sodium Hypochlo- rite. Branz Dent J 2002;13: 113-117

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