1 INTRODUCCIÓN

Los Streptococcus mutans son bacterias relacionadas directamente con el inicio de la caries dental debido a su potencial cariogénico.1 La homeostasis microbiana oral es “la capacidad de mantener la estabilidad de la comunidad

en un ambiente variable” cuando existe un cambio en este equilibrio en el que se encuentra la microbiota oral debido a una alteración en los entornos ambientales locales, como consecuencia se origina la caries dental de acuerdo a la hipótesis ecológica de la placa.2 Streptococcus mutans por

sus propiedades acidúricas y acidogénicas puede fermentar los carbohidratos como la sacarosa, glucosa, fructosa y pro- ducir ácido láctico, ácido propiónico, ácido acético y ácido fórmico. Estos ácidos circulan a través del biofilm dental y reaccionan con la superficie porosa del esmalte, disociándose y liberando iones de hidrógeno, éstos pueden disolver ágil- mente el mineral del esmalte, cediendo iones calcio y fosfato, de esta manera se descompone la estructura de la hidroxiapa- tita del esmalte. Este proceso se conoce como desmineraliza- ción.3 La Stevia principalmente es usada en el tratamiento de alteraciones de la piel, sustituto del azúcar y en prevención de caries. Se ha informado que tiene efectos bactericidas sobre Streptococcus mutans, al poseer propiedades antibacterianas y antivirales.4 Los esteviósidos regulan el nivel de glucosa en la sangre debido al aumento en la producción de insulina y una mejor utilización de la glucosa por los tejidos periféricos y los músculos en ratas diabéticas; a su vez se postula que los esteviósidos neutralizan la glucotoxicidad en la células beta o también suprimé la excreción de glucagón por parte de las células alfa del páncreas.5

La Stevia no contiene calorías y las hojas de la planta pueden utilizarse en su estado natural en pequeñas canti- dades, a causa de su gran poder edulcorante.6 El Xilitol remineraliza el diente y el hueso, es antimicótica y antibacte- riano principalmente sobre Streptococcus mutans en la saliva además de mejorar el flujo salival, biofilm dental, mejora la flora bacteriana y el sistema inmunológico. Con propiedades demostradas en varios estudios se puede decir que el Xilitol inhibe el crecimiento del microorganismo causante de caries dental Streptococcus mutans, debido al efecto del Xilitol sobre el metabolismo bacteriano lo que reduce el índice de crecimiento y la producción de ácido por parte de la bacteria. Con el uso del Xilitol, a través del tiempo con lleva a niveles reducidos de la bacteria cariogénica en la boca y por ende menos caries sobre las superficies de los dientes. Se forma menos Biofilm dental y reduce la producción de ácidos que atacan las superficies de los dientes, bloqueando de esta manera la alteración de las características del esmalte y estimulando la remineralización.1, 7

2 MATERIALES Y MÉTODOS

Se realizó una investigación de carácter experimental en donde a través de un estudio in vitro se comparó la influencia de la Stevia y el Xilitol sobre el crecimiento de cepas de Streptococcus mutans (ATCC 25175). Para la obtención del extracto se diluyó 100 gr de Xilitol en azúcar en 100 mL de agua destilada utilizado como solvente (dilución al 100 %) posteriormente se colocó en frascos estériles; se compró el extracto de Stevia de la marca NUTRASTEVIA y clorhexidina al 2 % (MAQUIRA). Una vez obtenidas las diluciones a la concentración deseada, se preparó el medio de cultivo utilizando Agar Mueller Hinton (OXOID) con sangre de cordero desfibrinada, para 8 frascos de 500 ml se colocó 150 gr de Agar Mueller Hinton posteriormente se

procedió a llevar al autoclave a 121 grados centigrados por 15 minutos. El ensayo microbiológico se realizó con técnica de agar difusión con bacterias y perforación en placa; se preparó una suspensión en caldo nutritivo de la bacteria, una vez que el agar tomó la temperatura deseada (aún en estado líquido), se combina con la sangre de cordero y se colocó 80 mL de la suspensión con una probeta y fueron suspendidas en las 25 placas Petri.

Cuando el agar gelificó, se procedió a hacer cuatro pozos en cada placa Petri con medida de 6mm de diámetro, se realizó la siembra de la suspensión en caldo nutritivo de Streptococ- cus mutans con hisopos estériles por toda la superficie del Agar; se aplicó con una micropipeta 40 uL de las diluciones de cada extracto y de las soluciones de control en los pozos; el ensayo se realizó de forma duplicada con cada uno de los extractos. Las cajas de Petri se taparon y se dejaron reposar a temperatura ambiente durante 30 minutos para lograr una mejor difusión de la sustancia; luego estas mismas se colocaron dentro de las jarras de anaerobiosis y cerradas con una vela encendida por dentro disminuyendo el oxígeno y así generar producción de CO2 mediante la combustión incompleta y posteriormente introducirlas en la campana de incubación a 37 grados centigrados y se evaluaron a las 24, 48 horas después para determinar el efecto de estos extractos en el crecimiento de las bacterias.

3RESULTADOS

Se determinó que la Stevia tiene alta inhibición de la actividad microbiana frente a los Streptococcus mutans en comparación al Xilitol con dilución ya que en la experiencia se observó mayor crecimiento de los halos de inhibición observando una diferencia considerable.

La Stevia tiene alta actividad antimicrobiana frente a los Streptococcus mutans ya que a las 24 horas presentó halos de inhibición bacteriana de 13.2 mm en promedio y a las 48 horas dichos halos de inhibición bacteriana crecieron hasta llegar a 14.61mm.

El Xilitol presenta alta actividad antimicrobiana frente a los Streptococcus mutans ya que se observó formación de halos de inhibición bacteriana de 8.6 mm en promedio a las 24 horas y de 9.51 mm a las 48 horas de control.

Se determinó que la Stevia y el Xilitol presentan alta actividad antimicrobiana; según las estadísticas a las 24 horas la Stevia presentó halos de inhibición de 13.2 mm y a las 48 horas presentó halos de14.61mm a diferencia del Xilitol que en su primer control de 24 horas presentó halos de 8.6

mmy a las 48 horas presentó halos de 9.51mm demostrando que ambos presentan alta actividad antimicrobiana pero la Stevia tiene mayor actividad antimicrobiana frente a los Streptococcus mutans.

4 DISCUSIÓN

El presente estudio es un trabajo inédito que ha com- parado dos edulcorantes como son la Stevia y el Xilitol. Laprade,8 realizó un estudio in vitro donde analizó la efi- cacia del colutorio de Gluconato de Clorhexidina frente los Streptococcus mutans y otras bacterias de la cavidad bucal, determinando que el gluconato de la Clorhexidina no es eficaz frente a los Streptococcus mutans. Este estudio no concuerda con estos resultados ya que se demostró la eficacia y la gran actividad antimicrobiana de la Clorhexidina al 2 % frente a los Streptococcus mutans. Así mismo Velasquez,9 evaluó el uso de la goma de mascar con Xilitol asegurando que esta reducía la cantidad del biofilm dental, aumentaba el flujo salival y el pH, en la cual se concuerda con la afirmación de este ya que se pudo demostrar la efectividad del Xilitol frente a los Streptococcus mutans, bacterias que están presentes en la cavidad bucal.

Bahador A et,10 al aseguran que el consumo habitual de Xilitol reduce el número de Streptococcus mutans por lo tanto reduce los niveles cariogénicos, este estudio concuerda con el autor ya que se comprobó la eficacia del Xilitol frente a los Streptococcus mutans bacterias más frecuentes de la cavidad bucal causantes de la caries.

Por otro lado Gholam R et al,11 estudiaron los efectos del Xilitol y el Eritritol en el crecimiento de los Streptococcus mutans y comparar sus efectos. Independientemente de la concentración se encontró un resultado más eficaz en el Eritritol que en el Xilitol en la inhibición del crecimiento y la formación de biofilm de cepas de Streptococcus utilizados en este estudio. Este estudio concuerda con el autor ya que en el presente estudio también se comparó dos endulzantes (Stevia y Xilitol) en las cuales los resultados microbiológicos fueron similares el Xilitol presentó menor actividad antimicrobiana que la Stevia; en conclusión si reduce la actividad microbiana de los Streptococcus mutans. Vitery G et al,12 aseguran que la Stevia tiene actividad antimicrobiana sobre el crecimiento de cepas de Streptococcus mutans, esta teoría se reafirma en este estudio ya que se logró demostrar la actividad antimicrobiana de la Stevia frente a los Streptococcus mutans mostrando tamaños considerables de halos de inhibición.

Pérez C et al,13 estudiaron los cambios en los niveles de Streptococcus mutans en saliva después de usar una goma de mascar que contiene Xilitol, aseguran que el Xilitol reduce la cantidad de Streptococcus mutans en la Saliva y este efecto continuó aun habiéndose detenido el consumo de la goma de mascar con Xilitol, este estudio está de acuerdo con esta teoría ya que en el presente estudio se comprobó que el Xilitol disminuye la actividad antimicrobiana frente los Streptococcus mutans.

Manish B et al,14 confirma la potencialidad antimicrobiana del extracto de la hoja de Stevia frente a los Streptococcus mutans, esta teoría se reafirmó en este estudio ya que se observó la formación de halo de inhibición de tamaños con- siderables. El Xilitol reduce la formación del Biofilm dental

Tabla 1. Determinar el nivel de la actividad antimicrobiana de la Stevia frente a los Streptococcus Mutans In Vitro, a las 24 y 48 horas.

Tabla 2. Determinar el nivel de la actividad antimicrobiana del Xilitol frente a los Streptococcus Mutans In Vitro, a las 24 y 48 horas.

por tanto disminuye la colonización microbiana de los dientes según asegura Batellino.15 Se coincide con el autor ya que en la experiencia se demostró la inhibición de la actividad antimicrobiana del Xilitol.

Lopez N et al.16 Afirma que la solución de fluoruro de sodio con la adición de Xilitol redu- cen significativamente el número de Streptococcus mutans; se concuerda con el autor ya que se puedo comprobar la actividad antimicrobiana del Xilitol frente a la sepa de los Streptococcus mutans.

5 CONCLUSIONES

En el presente estudio se determinó que la Stevia tiene alta inhibición de la actividad microbiana frente a los Streptococcus mutans en comparación al Xilitol con dilución ya que en la experiencia se observó mayor crecimiento de los

Tabla 3. Comparar el nivel de la actividad antimicrobiana de la Ste- via, Xilitol y clorhexidina 2 % frente a los Estreptococcus Mutans In Vitro, a las 24 y 48 horas